Controllo delle prestazioni di fluorescenza

Eseguire il controllo delle prestazioni di fluorescenza ogni 6 mesi per confermare che le prestazioni e l’accuratezza della fluorescenza rientrino nelle specifiche. Questo modulo è disponibile solo sugli strumenti NanoDrop Ultra FL e NanoDrop Ultrac FL.

Forniture necessarie

• kit del test di verifica della fluorescenza FL-1 (CHEM-FL1-KIT)

–Soluzione di reagente per bianco

–Reagente a fluorescenza verde

–Reagente a fluorescenza rosso lontano

• provette di plastica, da 0,2 mL, con tappo piatto o simili

• salviette da laboratorio prive di pelucchi

• acqua deionizzata (DI H2O)

• pipettatore di precisione calibrato (0–2 µL)

• guanti da laboratorio

• agitatore Vortex

• mini centrifuga

Prima di iniziare

Preparare tre provette gialle di plastica sterile per tre dei quattro reagenti forniti nel FL-1 Fluorescence Verification Kit (reagente per il bianco, reagente di fluorescenza verde e reagente di fluorescenza rosso lontano) ed etichettarli Bianco, Verde standard 2 e Rosso lontano standard 2.

Preparare altre due provette gialle di plastica sterile per le diluizioni sia del reagente di fluorescenza verde sia del reagente di fluorescenza rosso lontano ed etichettarli Verde standard 1 e Rosso lontano standard 1.

Provetta del bianco

–Aggiungere 100 µL di reagente per bianco nella provetta del bianco.

Provetta Standard 2 verde

–Aggiungere 33 µL di reagente di fluorescenza verde.

Provetta Standard 2 rosso lontano

–Aggiungere 45 µL di reagente di fluorescenza rosso lontano.

Provetta Standard 1 verde

–Trasferire 27 µL di reagente per bianco dalla provetta contrassegnata come Bianco.

–Trasferire 3 µL di Standard 2 verde e agitare su Vortex per 3-5 secondi.

–Centrifugare brevemente; un reagente di fluorescenza verde diluito 10 volte è pronto.

Provetta Standard 1 rosso lontano

–Trasferire 15 µL di reagente per bianco dalla provetta contrassegnata come Bianco.

–Trasferire 15 µL di Standard 2 rosso lontano e agitare su Vortex per 3-5 secondi.

–Centrifugare brevemente; un reagente di fluorescenza rosso lontano diluito 2 volte è pronto.

Per eseguire un controllo delle prestazioni di fluorescenza

1. Nella schermata iniziale, selezionare l’icona Diagnostica , quindi Fluorescence Performance Verification (Verifica delle prestazioni di fluorescenza).

2. Verrà visualizzato un messaggio che indica che il test richiede l’uso del kit di verifica della fluorescenza FL-1; selezionare Run (Esegui).

3. Assicurarsi che non ci sia nulla sul piedistallo e selezionare Blank (Bianco).

4. Pipettare 2 µL di reagente per bianco dalla provetta del Bianco sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata , abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata , abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

5. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.

6. Ripetere i passaggi 4 e 5 per un totale di cinque misurazioni.

7. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza verde diluito dalla provetta Standard 1 verde sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

8. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.

9. Ripetere i passaggi 7 e 8 per un totale di cinque misurazioni.

10. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza verde dalla provetta Standard 2 verde sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

11. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.

12. Ripetere i passaggi 10 e 11 per un totale di cinque misurazioni.

13. Pipettare 2 µL di reagente per bianco dalla provetta del Bianco sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

14. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.

15. Ripetere i passaggi 13 e 14 per un totale di cinque misurazioni.

16. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza rosso lontano diluito dalla provetta Standard 1 rosso lontano sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

17. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.

18. Ripetere i passaggi 16 e 17 per un totale di cinque misurazioni.

19. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza rosso lontano dalla provetta Standard 2 rosso lontano sul piedistallo inferiore.

a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.

b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).

20. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova. Ripetere i passaggi 19 e 20 per un totale di cinque misurazioni.

Per interpretare i risultati del controllo delle prestazioni di fluorescenza

Il risultato complessivo del test verrà visualizzato nella parte superiore dello schermo con un messaggio verde “Pass” (Superato) o rosso “Fail” (Non superato).

Se i risultati non rientrano nelle specifiche, ripetere la procedura con nuove diluizioni dei reagenti FL-1.

Se i risultati non soddisfano le specifiche dopo il secondo tentativo, contattare la nostra azienda.