Calcoli

Come per le altre applicazioni per gli acidi nucleici, l’applicazione OD600 utilizza una modifica dell’equazione di Beer-Lambert per calcolare la concentrazione del campione, in cui il coefficiente di estinzione e la lunghezza del percorso vengono combinati e indicati come “fattore”. L’applicazione OD600 offre un fattore specificato dall’utente, da utilizzare insieme alla legge di Beer per calcolare la concentrazione del campione. Se il fattore è noto, inserirlo. Diversamente, utilizzare 1x108, che è il fattore generalmente accettato per la maggior parte delle sospensioni cellulari batteriche come E. coli. |  | Valori misurati Assorbanza A600 Nota: le misurazioni dell’assorbanza microvolumetrica e le misurazioni effettuate con cuvette non standard (diverse da 10 mm) sono normalizzate con un equivalente della lunghezza del percorso di 10 mm. • I valori di assorbanza delle colture cellulari vengono misurati a 600 nm utilizzando lo spettro normalizzato. Se non si specifica alcuna correzione dell’assorbanza, questo è il valore A600 riportato e il valore usato per calcolare la concentrazione cellulare. • Se si specifica una Correzione dell’assorbanza, il valore di assorbanza a 600 nm, normalizzato e corretto viene riportato e utilizzato per calcolare la concentrazione cellulare. Assorbanza A(l) • Viene riportato anche il valore di assorbanza normalizzato e corretto (se utilizzato) rilevato a qualsiasi lunghezza d’onda monitorata supplementare (l) specificata.
Le concentrazioni cellulari calcolate si basano sul valore di assorbanza a 600 nm, sul fattore inserito e sulla lunghezza del percorso del campione. Può essere applicata una correzione dell’assorbanza a punto singolo. |  | Lunghezza del percorso del campione • Per le misurazioni microvolumetriche, il software seleziona la lunghezza ottimale del percorso (tra 1,0 mm e 0,03 mm) in base all’assorbanza del campione alla lunghezza d’onda dell’analisi. • Per le misurazioni in cuvetta, viene selezionata la lunghezza del percorso dopo il passaggio alla modalità cuvetta. (Vedere Cuvette Settings (Impostazioni della cuvetta). • Gli spettri e i valori di assorbanza visualizzati sono normalizzati a un equivalente della lunghezza del percorso di 10 mm.
|  | Valori riportati Concentrazione cellulare. Riportata in cellule/mL. I calcoli si basano sull’equazione di Beer-Lambert utilizzando il valore di assorbanza A600 corretto.