Limiti di rilevamento per applicazioni basate sull’assorbanza

Tipo di campione | Limite inferiore di rilevamento | Limite superiore di rilevamento | Riproducibilità tipica a
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dsDNA | 1,0 ng/µL (piedistallo) 0,20 ng/µL (cuvetta) | 27.500 ng/µL (piedistallo) 75 ng/µL (cuvetta) | ±1,0 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 1,0 e 100 ng/µL; ±2% per campioni >100 ng/µL
ssDNA | 0,66 ng/µL (piedistallo) 0,13 ng/µL (cuvetta) | 18.150 ng/µL (piedistallo) 49,5 ng/µL (cuvetta) | ±0,66 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 0,66 e 100 ng/µL; ±2% per campioni >100 ng/µL
RNA | 0,8 ng/µL (piedistallo) 0,16 ng/µL (cuvetta) | 22.000 ng/µL (piedistallo) 60 ng/µL (cuvetta) | ±0.8 ng/µL per concentrazioni di campioni comprese tra 0.8 e 100 ng/µL; ±2% per campioni >100 ng/µL
Microarray di DNA (ssDNA) | 1,3 ng/µL (piedistallo) 0,13 ng/µL (cuvetta) | 495 ng/µL (piedistallo) 49,5 ng/µL (cuvetta) | ±1,3 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 1,3 e 100 ng/µL; ±2% per campioni >100 ng/µL
BSA purificata mediante Protein A280 IgG mediante Protein A280 | 0,03 mg/mL (piedistallo) 0,006 mg/mL (cuvetta) 0,02 mg/mL (piedistallo) 0,003 mg/mL (cuvetta) | 820 mg/mL (piedistallo) 402 mg/mL (piedistallo) | ±0,03 mg/mL (per campioni da 0,03–10 mg/mL); ±2% per campioni >10 mg/mL
BSA purificata mediante Proteins & Labels | 0,03 mg/mL (piedistallo) 0,006 mg/mL (cuvetta) | 19 mg/mL (piedistallo) | ±0,06 mg/mL (per campioni da 0,06–10 mg/mL)
Protein BCA | 0,125 mg/mL (volume di reagente/ campione 20:1) 0,02 mg/mL (volume di reagente/ campione 1:1) | 2,0 mg/mL 0,20 mg/mL | 2% per l’intero intervallo 0,01 mg/mL per l’intero intervallo
Protein Lowry | 0,2 mg/mL | 1,5 mg/mL | 2% per l’intero intervallo
Protein Bradford | 100 mg/mL (volume di reagente/ campione 30:1) 15 mg/mL (volume di reagente/ campione 1:1) | 1.000 µg/mL 100 µg/mL | ±25 µg/mL per campioni da 100–500 µg/mL ±5% per campioni da 500–1.000 µg/mL ±4 µg/mL per campioni da 15–50 µg/mL ±5% per campioni da 50–100 µg/mL
Protein Pierce 660 | 50 µg/mL (volume di reagente/ campione 15:1) 25 µg/mL (volume di reagente/ campione 7,5:1) | 2.000 µg/mL 1.000 µg/mL | ±3 µg/mL per campioni da 50–125 µg/mL ±2% per campioni >125 µg/mL ±3 µg/mL per campioni da 25–125 µg/mL ±2% per campioni >125 µg/mL

aBasato su cinque replicati (DS=ng/µL; CV=%)

Nota Per ridurre al minimo l’errore dello strumento con campioni altamente concentrati, effettuare delle diluizioni per garantire che le misurazioni siano effettuate entro i seguenti limiti di assorbanza: • Per le misurazioni microvolumetriche, l’assorbanza massima a 260 nm (per gli acidi nucleici) o a 280 nm (per le proteine) deve essere inferiore a 62,5 A. • Per le misurazioni con cuvette con lunghezza del percorso di 10 mm, l’assorbanza massima a 260 nm (o 280 nm per le proteine) deve essere inferiore a 1,5 A, ovvero circa 75 ng/µL di dsDNA.