サンプルとブランクの準備

サンプルの調製

• サンプル測定の前にサンプルを抽出・精製します。これを目的とする市販のサンプル分離キットが提供されています。またはラボでご使用中のプロトコルを使用します。精製後、目的分析物は通常、測定前に緩衝液により溶解します。

ヒント：分析波長で光を吸収する分子は、サンプル濃度の算出に使用される総吸光度値に影響します。

• 最終的分析濃度が装置の吸光度検出限界範囲内に収まるようにします。

• マイクロボリューム測定では、測定前に各サンプルを静かに (ただし十分に） ボルテックスします。

混合およびピペット操作時は気泡の混入に気をつけてください。

注意 ヘキサンなどの非常に揮発性の高い溶媒で溶解されたサンプルは、キュベットサンプリングオプション（NanoDrop UltraおよびNanoDrop Ultrac FLC FL装置のみ）で最適に機能する可能性があります。

ブランクの選択と測定

サンプル分析物の懸濁に使用される緩衝液は、吸光度に影響する可能性があります。ブランキングは、サンプル測定からの緩衝液成分による吸光度への寄与を最小限に抑えます。その結果生じるサンプルスペクトルは、目的分析物のみの吸光度を示します。

正しい結果を得るために

• 大部分のアプリケーションで、目的分析物を懸濁するのと同じ緩衝液をブランクにします。ブランク溶液は、サンプルと同じpHおよびイオン強度にする必要があります。

• サンプル測定の前に新しいブランクを測定します。サンプルが同じ緩衝液であれば、サンプル測定前に毎回ブランク設定する必要はありません。

• 30分ごとに新しいブランクを測定します。

• サンプル測定に使用する前に、ブランキングサイクルを実行して、ブランキング溶液の適合性を評価します。

結果として生じるスペクトルは、以下の例のように分析波長において、スペクトル全体で0.02 Aまたは0.4 A（10 mm相当）以下で変動するはずです。

結果として生じるスペクトルが分析波長付近で0.02 Aまたは0.4 Aを超えている場合、特に低濃度サンプルにおいて、緩衝液はサンプル分析に干渉する可能性があります。詳細については以下を参照してください。

ブランクに関連した問題

• ブランク測定が実行される前には、残留サンプルが台座またはキュベットに残っている。(その結果生じるサンプルスペクトルは、負の吸光度値を示す可能性があります。これは、スペクトルのその領域でブランクの吸光度がサンプルよりも高いことを示します）。

• ブランク測定は、分析波長で不明なサンプルよりも高い吸光度を示す。(ブランクとして使用した緩衝液が、サンプルの懸濁に使用されたものと異なる組成の場合、測定結果は正確ではありません）。

• サンプルは装置をブランクにするために誤って使用された。（その結果生じるサンプルスペクトルは、負の吸光度値を示したり、場合によっては、以下に示す例のように典型的な核酸またはタンパク質スペクトルの鏡像のようになったりします）。

ブランクの問題に対する解決策

• 両方の台座を入念にクリーニングおよびリコンディショニングし、その後以下のことを行います。

–ブランクサイクルに戻る

–新しいアリコートの適切な緩衝液を使用して新たにブランクを測定し、その後、新しいアリコートの未知のサンプルを測定する。

大部分のアプリケーションで、目的分析物を懸濁するのと同じ緩衝液をブランクにします。ブランク溶液は、サンプルと同じpHおよびイオン強度にする必要があります。