タンパク質とラベル測定

タンパク質とラベルアプリケーションを使用して、波長比を使用して、タンパク質とタンパク質配列複合体の蛍光色素、およびヘモグロビンなどの金属タンパク質を定量化します。このアプリケーションは、280 nmで測定されたタンパク質濃度、A260/A280吸光度比、および色素の濃度と測定された吸光度値を報告します。これにより、0.2pmol/uL (ピコモル/マイクロリットル) 以下の色素濃度の検出が可能になります。この情報は、下流アプリケーションで使用するために、タンパク質/色素コンジュゲーション（ラベリングの程度）を評価するために役立ちます。

始める前に...

NanoDrop Ultra装置で台座測定を行う前に、装置のアームを上げて、上側および下側の台座をクリーニングします。少なくとも、台座を新しいラボペーパーで拭きます。詳細については、「台座のクリーニング」を参照してください。

注意事項 • 液体が装置に流れ込み永久的な損傷を引き起こす可能性があるため、装置の上またはその近くで噴射器またはスプレーボトルを使用しないでください。 • 台座でフッ化水素酸（HF）を使用しないでください。フッ化物イオンは石英光ファイバーケーブルに永久的な損傷を与えます。

手順

1. ホーム画面から [Proteins（タンパク質）]タブを選択し、[Protein & Labels（タンパク質とラベル） ]を選択します。

2. 必要に応じて設定オプションを設定し、[Save（保存）]を選択します。

ヒント：事前定義されたリストから色素を選択するか、「色素/クロモフォア編集」を使用してカスタム色素を追加します。

3. NanoDrop UltracまたはNanoDrop UltracFLモデルを使用している場合は、正しい測定経路を選択します。

–キュベットを使用する場合は、画面上部のドロップダウンメニューから [Cuvette（キュベット）]を選択します。これによりキュベット設定が表示されます。希望の光路長、攪拌速度、および 加熱を選択し、ドロップダウンメニューを閉じます。

–測定に台座を使用する場合は、画面上部で [Pedestal（台座）]を選択したままにします。

4. ブランキング溶液1 ～ 2 µLをピペットで取り、下側の台座に滴下し、アームを下げるか、またはブランキングキュベットをキュベットホルダーに挿入します。

ヒント：キュベットを使用する場合は、キュベットの光路と装置の光路を合わせてください。

5. [Blank （ブランク）]を選択し、測定が完了するまで待ちます。

ヒント：[Auto-Blank（自動ブランク）]がオンの場合、アームを下げた後に自動的にブランク測定が開始されます。（このオプションはキュベット測定では使用できません。）

6. アームを持ち上げて、両方の台座を新しいラボペーパーでクリーニングするか、ブランキングキュベットを取り外します。

7. サンプル溶液2 µLをピペットで取り、台座に滴下し、アームを下げるか、またはサンプルキュベットをキュベットホルダーに挿入します。

8. サンプル測定を開始します。

–台座：[Auto-Measure（自動測定）]がオンの場合はアームを下げます。[Auto-Measure（自動測定）]がオフの場合はアームを下げて[Measure（測定）]を選択します。

–キュベット：[Measure（測定）]を選択します。

サンプル測定が完了したら、スペクトルおよび報告された値が表示されます（次のセクションを参照）。

9. サンプルの測定が終了したら、[End Experiment（実験終了）]を選択します。

10. アームを上げ、新しいラボペーパーで両方の台座をクリーニングするか、サンプルキュベットを取り外します。

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