算出

核酸アプリケーションでは、改良された ランベルト・ベールの方程式（右図参照）を使用し、吸光係数と光路長を組み合わせた「係数」を用いてサンプル濃度を算出します。 |  | 吸光係数と係数 ランベルト・ベールの方程式の項を使用して、係数 (f) は以下のように定義されます。 係数 (f) = 1/(e * b) 説明： e = 波長依存のモル吸光係数（ng・cm/µL 単位） b = サンプルの光路長（cm単位） その結果、被分析物濃度 (c) が以下のように計算されます。 c = A * [1/(e * b)] または c = A * f 説明： c = ng/µLでの分析物濃度 A = 吸光度単位 (A) の吸光度 f = ng-cm/μLの因子（下記参照）
dsDNA、ssDNA、およびRNAアプリケーションの場合、核酸に関する標準的な係数をベールの法則と併用して、サンプル濃度を算出します。カスタム係数アプリケーションの場合、ユーザー指定の係数が使用されます。 |  | 使用される係数 • dsDNA（係数 = 50 ng-cm/µL） • ssDNA（係数 = 33 ng-cm/µL） • RNA（係数 = 40 ng-cm/µL） • カスタム係数（15ng-cm/µL ～ 150ng-cm/µLの間のユーザーが入力した係数）
算出される核酸濃度は、260 nmでの吸光度値、使用される係数、およびサンプル光路長に基づきます。シングルポイントベースライン補正（または分析補正）も適用できます。 濃度は、質量単位として報告されます。計算器はインターネット上で利用可能で、サンプル配列に基づいて濃度を質量単位からモル単位に変換します。 260 nm と280 nm、場合によって 230 nmでの吸光度値が、測定された核酸サンプルの純度比を算出するために使用されます。純度比は、サンプルの精製時に通常使用される残留溶剤および試薬など、サンプル中の不純物の存在に影響を受けます。 |  | 測定値 注記：マイクロボリューム吸光度測定や、10 mm以外の非標準キュベットで測定した場合、スペクトルは 10 mm光路長相当に正規化されます。 A260吸光度 • 核酸吸光度値は、正規化されたスペクトルを使用して260 nmで測定されます。[Baseline Correction（ベースライン補正）]が選択されていない場合に表示されるA260値です。 • [Baseline Correction（ベースライン補正）]が選択された場合、補正波長での吸光度値は、260 nmでの吸光度から差し引かれます。補正された260 nmにおける吸光度が表示され、核酸濃度の計算に使用されます。 A230およびA280吸光度 • 230 nm および280 nmで正規化され、（選択されている場合）ベースライン補正された吸光度値は、A260/A230およびA260/A280 比を計算するために使用されます。
|  | サンプル光路長 • マイクロボリューム測定の場合、分析波長でサンプル吸光度に基づいて、最適な光路長（1.0 mm ～ 0.03 mmの範囲）が選択されます。 • キュベット測定の場合、キュベットモードに切り替えた後に選択された光路長が使用されます。（「キュベット 設定」を参照。） • 表示されるスペクトルおよび吸光度値は、10 mm光路長相当に正規化されます。
|  | 測定値 • 核酸濃度 選択した単位（つまり、ng/µL、µg/uL、または µg/mL）で報告されます。算出は、補正された核酸吸光度値を使用する、変形されたベールの法則に基づきます。 • A260/A280純度比 280 nmで補正された吸光度に対する、260 nmで補正される吸光度の比率。1.8以下の A260/A280 純度比は、DNAに対して「純粋」と一般に認められています（RNAの場合は2.0以下）。酸性溶液では、0.2 ～ 0.3 までの報告された値が過小評価されます。基本溶液についてはその逆も言えます。 • A260/A230純度比 230 nmで補正された吸光度に対する、260 nmで補正される吸光度の比率。1.8 ～ 2.2の間のA260/A230純度比は、DNAとRNAに対して「pure （純粋）」と一般に認められています。 注記：純度比はサンプル品質の重要な指標ですが、最高品質の指標は、関心下流アプリケーションの機能です（リアルタイムPCRなど）。 • 係数 ベールの法則と併用してサンプル濃度を計算するために使用されます。 • 不純物 - Acclaroソフトウェアによって不純物が特定された場合、この列に表示されます。 • 係数 ベールの法則と併用して、サンプル濃度を計算します。 • ベースライン補正 ベースライン補正用に選択された波長とその波長で検出された吸光度。 • 位置 測定が台座モードから行われたことを表示し ます。 • 波長のモニタリング レポートに含めたい吸光度値の追加波長を入力します。
|  | • 不純物 Acclaroソフトウェアによって不純物が特定された場合、この列に表示されます。 • 補正値 Acclaroソフトウェアを使用して決定された補正後の分析物濃度を表示します（利用可能な場合）。 • 種類 Acclaroソフトウェアによって検出された核酸不純物の種類 • キット名 qPCRレシピ算出の決定に使用されたqPCRキット名を提供します（セットアップ中に選択された場合）。 • サンプル希釈比率 qPCR前にサンプルの希釈が推奨される場合、最終希釈量に対する測定サンプルの体積比を表示します。 • 必要とする希釈：核酸量（μL） 核酸量（μL）。qPCR前にサンプルの希釈が推奨される場合、希釈チューブに加える元の核酸サンプルの量を表示します。 • 必要とする希釈：核酸量（μL） qPCR前にサンプルの希釈が推奨される場合、希釈チューブに加える希釈液の量を表示します。 • キット反応：核酸量（µL） 「必要とする希釈」フィールドで希釈が推奨されていない場合、qPCR反応チューブに加える元の核酸サンプルの量を示します。「必要とする希釈」フィールドで希釈が推奨された場合、qPCR反応チューブに加える核酸希釈液の量を示します。 • キット反応：水量（µL） qPCR反応チューブに加える水の量を表示します。 • キット反応：最終テンプレート濃度。核酸サンプルがqPCR反応チューブに加えられた後の濃度を表示します。
|  | • スターラー キュベットモデルのスターラー機能が使用されていない場合は「オフ」と表示されます。スターラー機能が使用されている場合は、撹拌速度が表示されます。 • ヒーター 測定中にキュベットポートが加熱されたかどうかを示す「オフ」または「オン」が表示されます。 • 測定温度 測定中のキュベットポートの温度が表示されます。 • 目標温度 キュベットポートの希望温度が表示されます。