算出

他のタンパク質アプリケーションと同様に、タンパク質とラベルでは、 ランベルト・ベールの方程式を使用して、サンプルの吸光係数と光路長に基づき吸光度を濃度に関連付けます。 このアプリケーションには6つのオプションがあり（右に示されています）、測定された各サンプルに適切な吸光係数を選択することができます。吸光係数はサンプル濃度を算出するためにベールの法則と併用されます。 サンプルの吸光係数が分かっている場合は、e + e + MW (モル) またはe1% (質量) オプションを選択し、値を入力します。係数が分からない場合は、吸光係数を算出するか、またはサンプル溶液に最適なオプションを選択します。 ヒント：理想的には、吸光係数は同じ緩衝液を使用して、既知の濃度で研究対象タンパク質の溶液を使用して実験的に決定される必要があります。 |  | 吸光係数に利用可能なオプション • 1 Abs = 1 mg/mL。サンプルタイプおよび/または吸光係数が不明な場合（タンパク質濃度の概算が生成されます） • BSA（ウシ血清アルブミン、6.7L/gm-cm） • IgG（哺乳類抗体、13.7L/gm-cm） • リゾチーム（卵白リゾチーム、26.4L/gm-cm） • その他のタンパク質（ (e + MW）、ユーザー指定のモル吸光係数 • その他のタンパク質（ (e1%）、ユーザー指定の質量吸光係数 注記：詳細については、「サンプルタイプ」を参照してください。
算出されるタンパク質濃度は、280 nmでの吸光度値、選択（または入力）される係数、およびサンプル光路長に基づきます。シングルポイントベースライン補正（または分析補正）を適用できます。 濃度は、質量単位として報告されます。計算器はインターネット上で利用可能で、サンプル配列に基づいて濃度を質量単位からモル単位に変換します。 |  | 測定値 A280吸光度 注記：850 nmでの吸光度値は、スペクトル内のすべての波長から差し引かれます。その結果、850 nmでの吸光度は、表示されるスペクトル内でゼロになります。また、マイクロボリューム吸光度測定および標準外（10 mm以外）のキュベットを使用した測定では、スペクトルは10 mm光路長相当に規格化されます。 • タンパク質吸光度値は、850 nmで正規化されたスペクトルを使用して280 nmで測定されます。分析補正および色素補正が選択されていない場合、これは報告されるA280値およびタンパク質濃度を算出するために使用される値になります。 • [nalysis Correction（分析補正）]が選択されている場合、850 nmで補正・正規化され、かつ分析補正された280 nmの吸光度値が報告され、タンパク質濃度の算出に使用されます。 • 色素が使用されている場合は、850 nmで補正・正規化され、分析補正および色素補正された280 nmの吸光度値が報告され、タンパク質濃度の算出に使用されます。
色素濃度は、色素の分析波長、色素の吸光係数、およびサンプルの光路長での吸光度値から算出されます。スロープ色素補正も使用できます。 |  | 色素吸光度 • 色素吸光度値は特定の波長で測定されます。使用される分析波長については、「色素/クロモフォア編集」を参照してください。 • 「スロープ色素補正」が選択されている場合、400 nm～850 nmの範囲に線形ベースラインが引かれ、各色素について、スロープベースラインの吸光度値が各色素の分析波長での吸光度値から差し引かれます。ベースライン補正された色素吸光度値は、報告され、色素濃度を算出するために使用されます。 色素補正 • 事前定義された色素には、A260およびA280の既知の補正値があります。使用される補正値については、「色素/クロモフォア編集」を参照してください。 • A280 色素濃度は、タンパク質濃度を算出するために使用されるA280吸光度値から差し引かれます。
|  | サンプル光路長 • マイクロボリューム測定の場合、分析波長でサンプル吸光度に基づいて、最適な光路長（1.0 mm ～ 0.03 mmの範囲）が選択されます。 • キュベット測定では、キュベットモードに切り替えた後に選択された光路長が使用されます（「キュベット設定」を参照)。 • 表示されるスペクトルおよび吸光度値は、10 mm光路長相当に正規化されます。
|  | 測定値 • 位置 測定が台座から行われたかどうかを表示します。 • 波長のモニタリング レポートに含めたい吸光度値の追加波長を入力します。 • タンパク質濃度 選択した単位（mg/mLまたはµg/mL）で報告されます。算出は、補正されたタンパク質吸光度値を使用するランベルト・ベールの方程式に基づきます。 • 色素1/色素2濃度 pmol/µL単位で報告されます。算出は、傾斜ベースライン補正された色素吸光度値を使用するベールの法則に基づきます。 • 色素1/色素2ラベリングの程度 1分子のコンジュゲートあたりの蛍光色素分子の平均数を指定します。 • スターラー キュベットモデルのスターラー機能が使用されていない場合は「オフ」と表示されます。スターラー機能が使用されている場合は、撹拌速度が表示されます。 • ヒーター 測定中にキュベットポートが加熱されたかどうかを示す「オフ」または「オン」が表示されます。 • 測定温度 測定中のキュベットポートの温度が表示されます。 • 目標温度 キュベットポートの希望温度が表示されます。

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