Pierce 660 단백질 측정

Pierce 660 단백질 어세이는 독자적인 단백질 결합 물질을 비색 검출 시약으로 사용하여 정제되지 않은 단백질 샘플의 총 단백질 농도를 결정합니다. 이 애플리케이션은 고농도의 세제, 환원제 및 기타 일반적으로 사용되는 시약이 포함된 단백질 용액에 적합합니다. Pierce 660 단백질 애플리케이션은 660 nm에서 흡광도를 측정하고 표준 곡선을 사용하여 단백질 농도를 계산합니다(자세한 내용은 표준 곡선 작업하기 참조). 단일 지점 기준선 교정이 적용됩니다.

시작하기 전에..

NanoDrop Ultra 기기로 받침대 측정을 하기 전에, 기기의 암을 들어 올리고 상부 및 하부 받침대를 세척하십시오. 최소한, 새 실험실용 와이프로 받침대를 닦으십시오. 자세한 내용은 받침대 세척을 참조하십시오.

유의사항 •기기 위나 기기 근처에서 분무기나 스프레이 병을 사용하지 마십시오. 액체가 기기 내부로 흘러 들어가 영구적인 손상을 초래할 수 있습니다. •받침대에서 불화수소산(HF)을 사용하지 마십시오. 플루오르화물 이온은 석영섬유 광케이블을 영구적으로 손상시킵니다.

절차

1.홈 화면에서 Proteins(단백질)탭을 선택한 후, Protein Pierce 660(Pierce 660 단백질)를 선택하십시오.

2.원하는 경우 setup options(설정 옵션)를 구성하고 Save(저장)을 선택하십시오. (곡선 유형과 각 표준 물질의 반복 횟수를 지정하고 각 표준 물질의 농도를 입력하십시오.)

팁: 이 어세이의 경우, Curve Type(곡선 유형)을 "Linear"(선형)로 설정하는 것을 권장합니다.

3.NanoDrop Ultrac 또는 NanoDrop Ultrac FL 모델을 사용하는 경우, 올바른 측정 경로를 선택하십시오.

–큐벳을 사용할 경우, 화면 상단의 드롭다운 메뉴에서 Cuvette(큐벳)을 선택하면 큐벳 설정이 표시됩니다. 원하는 경로 길이, 교반 속도 및 가열을 선택한 후 드롭다운 메뉴를 닫으십시오.

–받침대를 사용하여 측정하는 경우, 화면 상단 설정에서 Pedestal(받침대)을 선택된 상태로 유지하십시오.

4.블랭크 측정:

–기준 용액 2µL를 하단 받침대와 하단 암에 피펫팅하거나, 기준 용액 블랭크 큐벳을 큐벳 홀더에 삽입합니다(기준 용액에는 표준 단백질 원액이 전혀 포함되지 않아야 합니다. 자세한 내용은 표준 곡선 작업 참조).

팁: 큐벳을 사용할 경우, 큐벳 빛경로를 기기 빛경로와 일치하도록 정렬했는지 확인합니다.

–Blank(블랭크)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

팁: Auto-Measure(자동 측정)가 켜져 있는 경우, 암을 내리면 표준 물질 측정이 자동으로 시작됩니다. (이 옵션은 큐벳 측정 시에는 사용할 수 없습니다).

–암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 블랭킹 큐벳을 제거하십시오.

5.기준 표준 물질 측정:

–기준 용액 2 µL를 받침대에 피펫팅하거나, 기준 큐벳을 삽입하십시오(기준 용액은 표준 단백질 원액이 포함되지 않아야 하며, 자세한 내용은 표준 곡선 작업을 참조하십시오.).

–Measure(측정)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

–암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 큐벳을 제거하십시오.

–Replicates(반복) 설정이 1보다 클 경우, 측정을 반복하십시오.

6.나머지 표준 물질 측정:

–표준 물질 1 2 µL를 받침대에 피펫팅하거나, 표준 물질 1 큐벳을 삽입하십시오.

–Measure(측정)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

–암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 큐벳을 제거하십시오.

–Replicates(반복) 설정이 1보다 클 경우, 측정을 반복하십시오.

–각 추가 표준 물질에 대해 위의 하위 단계를 반복하십시오(지정된 수의 표준 물질과 반복이 측정되면, 표준 물질을 재측정할 것인지, 추가 표준 물질을 로드할 것인지 또는 샘플 측정을 시작할 것인지를 묻는 메시지가 나타납니다).

–표준물질 측정을 마쳤으면, Measure Samples(샘플 측정)를 선택합니다.
로컬 제어 소프트웨어를 사용할 때 (왼쪽으로 스와이프하여 표준곡선을 보거나) PC 제어 소프트웨어를 사용할 때는 곡선 탭을 선택합니다.

7.샘플 측정:

–샘플 1 2 µL를 받침대에 피펫팅하거나, 샘플 1 큐벳을 삽입하십시오.

–Measure Samples(샘플 측정)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

–암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 큐벳을 제거하십시오.

–Replicates(반복) 설정이 1보다 클 경우, 측정을 반복하십시오.

8.샘플 측정이 모두 끝나면 End Experiment(실험 종료)를 선택하십시오.

9.암을 들어 올리고 새 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 샘플 큐벳을 제거하십시오.

관련 주제

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