단백질 측정을 위한 모범 사례

•단백질 샘플을 측정하기 전에 분리 및 정제하여 불순물을 제거하십시오. 샘플에 따라 불순물에는 DNA, RNA, 유리 단백질, 일부 완충용액 구성 요소가 포함될 수 있습니다. 자세한 내용은 샘플 준비를 참조하십시오.

알림 추출 시약은 200 nm와 280 nm 사이에서 흡광도를 나타내며, 샘플에 존재할 경우(잔류량이라도) 측정 결과에 영향을 미칩니다.

•샘플 흡광도가 기기의 흡광도 검출 한계 내에 있는지 확인하십시오.

•블랭크 선택:

–A280 단백질 Pro 애플리케이션의 경우, 분석 물질을 재현탁할 때 사용한 것과 동일한 완충용액을 이용하여 블랭킹하십시오. 기준(블랭킹)용액은 분석 물질 용액과 유사한 pH와 이온 강도를 가져야 합니다.

•완충용액의 흡광도 기여도를 평가하기 위해 블랭킹 사이클을 실행하십시오. 완충용액이 분석 파장(일반적으로 280 nm)에서 또는 그 근처에서 강한 흡광도를 나타내는 경우, 비색 어세이와 같이 다른 완충용액이나 애플리케이션(예시: BCA 또는 Pierce 660)을 선택해야 할 수도 있습니다. 자세한 내용은 블랭크 선택 및 측정을 참조하십시오.

알림 Triton X, RIPA, NDSB와 같은 완충용액은 상당한 흡광도를 나타내며 A280에서 직접 측정하는 방식과는 호환되지 않습니다.

•마이크로 부피 측정의 경우:

–받침대 표면이 적절히 세척 및 컨디셔닝 되어 있는지 확인하십시오. (단백질은 받침대 표면에 달라붙는 경향이 있습니다.)

–측정하기 전에 샘플을 부드럽게(그러나 철저하게) 볼텍싱하십시오. 혼합 및 피펫팅 시 기포가 생기지 않도록 하십시오.

–마이크로 부피 측정을 위한 모범 사례를 따르십시오.

–2 µL 부피의 샘플을 사용하십시오. 자세한 내용은 권장되는 샘플 부피를 참조하십시오.

관련 주제

•단백질 측정을 위한 모범 사례

•마이크로 부피 샘플 측정

•샘플 및 블랭크 준비

•기본 기기 작동