올리고 DNA 또는 올리고 RNA의 측정

올리고 DNA 및 올리고 RNA 애플리케이션을 사용하여 260 nm에서 흡광되는 올리고뉴클레오타이드를 정량합니다. 몰 소광 계수는 사용자가 정의한 샘플의 염기 시퀀스를 기반으로 자동 계산됩니다. 이러한 애플리케이션은 핵산 농도와 두 가지 흡광도 비율(A260/A280 및 A260/A230)을 보고합니다. 단일 지점 기준선 교정도 사용할 수 있습니다.

시작하기 전에..

NanoDrop Ultra 기기로 받침대 측정을 하기 전에, 기기의 암을 들어 올리고 상부 및 하부 받침대를 세척하십시오. 최소한, 새 실험실용 와이프로 받침대를 닦으십시오. 자세한 내용은 받침대 세척을 참조하십시오.

알림 올리고뉴클레오타이드가 형광단 염료와 같이 변형된 경우, 해당 변형이 260 nm에서의 흡광도에 영향을 미치는지 확인하려면 제조업체에 문의하십시오. 만약 그런 경우, Microarray(마이크로어레이) 애플리케이션을 사용하여 핵산 농도를 정량하는 것을 권장합니다. Microarray(마이크로어레이) 애플리케이션은 올리고 정량 결과에서 염료로 인한 흡광도 기여를 제거하는 교정을 포함합니다.

유의사항 •기기 위나 기기 근처에서 분무기나 스프레이 병을 사용하지 마십시오. 액체가 기기 내부로 흘러 들어가 영구적인 손상을 초래할 수 있습니다. •받침대에서 불화수소산(HF)을 사용하지 마십시오. 플루오르화물 이온은 석영섬유 광케이블을 영구적으로 손상시킵니다.

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절차

1.홈 화면에서 Nucleic Acids(핵산) 탭을 선택한 후, 필요에 따라 Oligo DNA
(올리고 DNA) 또는 Oligo RNA(올리고 RNA)를 선택하십시오.

2.원하는 경우 setup options(설정 옵션)를 구성하고 Save(저장)을 선택합니다.

3.NanoDrop Ultrac 또는 NanoDrop Ultrac FL 모델을 사용하는 경우, 올바른 측정 경로를 선택하십시오.

–큐벳을 사용할 경우, 화면 상단의 드롭다운 메뉴에서 Cuvette(큐벳)을 선택하면 큐벳 설정이 표시됩니다. 원하는 경로 길이, 교반 속도 및 가열을 선택한 후 드롭다운 메뉴를 닫으십시오.

–받침대를 사용하여 측정하는 경우, 화면 상단 설정에서 Pedestal(받침대)을 선택된 상태로 유지하십시오.

4.하부 받침대에 블랭킹 용액 1~2 µL를 피펫팅하고 암을 내리거나, 블랭킹 큐벳을 큐벳 홀더에 삽입하십시오.

팁: 큐벳을 사용할 경우, 큐벳 빛경로를 기기 빛경로와 일치시켜야 합니다.

5.Blank(블랭크)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

팁: Auto-Blank(자동 블랭크)가 켜져 있는 경우, 암을 내리면 블랭크 측정이 자동으로 시작됩니다. (이 옵션은 큐벳 측정 시에는 사용할 수 없습니다.)

6.암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 블랭킹 큐벳을 제거하십시오.

7.받침대에 샘플 용액 1~2 µL를 피펫팅하고 암을 내리거나, 샘플 큐벳을 큐벳 홀더에 삽입하십시오.

8.샘플 측정 시작:

–받침대: Auto-Measure(자동 측정)가 켜져 있는 경우, 암을 내립니다. Auto-Measure(자동 측정)가 꺼져 있으면 암을 내리고 Measure(측정)을 선택하십시오.

–큐벳: Measure(측정)을 선택하십시오.

샘플 측정이 완료되면, 스펙트럼과 보고된 값이 표시됩니다(다음 섹션 참조).

9.샘플 측정이 모두 끝나면 End Experiment(실험 종료)를 선택하십시오.

10.암을 들어 올리고 새 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 샘플 큐벳을 제거하십시오.

관련 주제

•핵산 측정의 모범 사례

•마이크로 부피 샘플 측정

•큐벳을 사용한 샘플 측정

•마이크로 부피 측정을 위한 모범 사례

•큐벳 측정을 위한 모범 사례

•샘플 및 블랭크 준비

•기본 기기 작동