계산

다른 단백질 애플리케이션과 마찬가지로, A205 단백질 애플리케이션은 샘플의 소광 계수와 경로 길이를 기반으로 흡광도와 농도를 연관시키기 위해 Beer-Lambert 방정식을 사용합니다. 이 애플리케이션은 각 측정 샘플의 적절한 소광 계수를 선택할 수 있는 세 가지 옵션(오른쪽에 표시됨)을 제공하며, 이는 Beer의 방정식과 함께 사용되어 샘플 농도를 계산합니다. 샘플의 소광 계수가 알려져 있는 경우, e1% (mass) 옵션을 선택하고 해당 값을 입력하십시오. 그렇지 않다면 소광 계수를 계산하거나, 샘플 용액에 가장 적합한 옵션을 선택하십시오. 팁: 이상적으로 소광 계수는 동일한 완충용액을 사용하여 알려진 농도의 분석 대상 단백질 용액을 이용하여 경험적으로 결정되어야 합니다. |  | 소광 계수에 대한 사용 가능한 옵션 •31, 다음과 같이 가정: 205 nm에서 e0.1%(1 mg/mL) = 31 •Scopes 방식은 다음과 같이 가정: 205 nm에서 e0.1%(1 mg/mL) = 27 + 120 * (A280/A205) •기타 단백질의 경우, 1 mg/mL(e0.1%) 단백질 용액에 대한 질량 소광 계수를 L/g·cm 단위로 입력하십시오. 참고: 자세한 내용은 Sample Type(샘플 유형)을 참조하십 시오. 측정된 값 A205 흡광도 참고: 마이크로 부피 흡광도 측정 및 비표준(10 mm 이외의) 큐벳으로 수행된 측정의 경우, 스펙트럼은 10 mm 경로 길이에 상응하도록 정규화됩니다. •단백질 흡광도 값은 205 nm 정규화된 스펙트럼을 사용하여 측정됩니다. 기준선 교정이 지정되지 않은 경우, 표시되는 A205 값이 그대로 보고되며, 해당 값이 단백질 농도 계산에 사용됩니다. •기준선 교정이 선택된 경우, 205 nm에서의 정규화되고 (흡광도) 교정된 기준선 값이 보고되며 이는 단백질 농도를 계산하는 데 사용됩니다. A280 흡광도 •280 nm에서의 정규화되고 기준선이 교정된(선택된 경우) 흡광도 값도 보고됩니다.
계산된 단백질 농도는 205 nm에서의 흡광도 값, 선택된(또는 입력된) 소광 계수 및 샘플 경로 길이를 기반으로 합니다. 단일 지점 기준선 교정도 적용될 수 있습니다. 농도는 질량 단위로 보고됩니다. 샘플 시퀀스를 기반으로 질량 농도를 몰 농도로 변환할 수 있는 계산기는 인터넷에서 이용할 수 있습니다. |
|  | 샘플 경로 길이 •마이크로 부피 측정의 경우, 소프트웨어는 분석 파장에서 샘플 흡광도를 기반으로 최적의 경로 길이(1.0 mm에서 0.03 mm 사이)를 선택합니다. •큐벳 측정의 경우, 큐벳 모드로 전환한 후 선택된 경로 길이가 사용됩니다(큐벳 설정참조). •표시된 스펙트럼 및 흡광도 값은 10 mm 경로 길이에 상응하도록 정규화됩니다.
|  | 보고된 값 •단백질 농도. 선택된 단위 (mg/mL 또는 µg/mL)로 보고됩니다. 계산은 교정된 단백질 흡광도 값을 사용하는 Beer-Lambert 방정식을 기반으로 합니다. •방법. 이는 Beer의 법칙과 함께 사용하여 샘플 농도를 계산하는 데 사용되는 소광 계수를 결정합니다. •기준선 교정. 기준선 교정을 위해 선택된 파장 및 해당 파장에서 검출된 흡광도. •위치. 측정이 받침대 또는 큐벳 모드에서 수행되었음을 표시합니다. •모니터링된 파장. 보고서에 포함하고자 하는 흡광도 값을 가진 추가 파장을 입력합니다. •질량 소광 계수(1% 용액).
|  | •교반기. 큐벳 모델에서 교반 기능이 사용되지 않을 때 "Off"가 표시됩니다. 교반 기능이 사용될 때, 교반 속도가 표시됩니다. •히터. 측정 중에 큐벳 포트가 가열되었는지 여부를 보여주기 위해 "Off" 또는 "On"이 표시됩니다. •측정 온도. 측정 중 큐벳포트의 온도가 표시됩니다. •목표 온도. 큐벳 포트의 희망 온도가 표시됩니다.