단백질 및 라벨 측정

단백질 및 단백질 배열 접합체용 형광 염료 또는 헤모글로빈과 같은 금속단백질을 파장 비율을 사용하여 단백질 및 라벨 애플리케이션을 통해 정량합니다. 이 애플리케이션은 280nm에서 측정된 단백질 농도, A260/A280 흡광도 비율, 염료의 농도 및 측정된 흡광도 값을 보고하며, 마이크로리터당 0.2 피코몰 수준의 염료 농도도 검출할 수 있습니다. 이 정보는 다운스트림 애플리케이션에 사용하기 위한 단백질/염료 접합(라벨링 정도)을 평가하는 데 유용합니다.

시작하기 전에..

NanoDrop Ultra 기기로 받침대 측정을 하기 전에, 기기의 암을 들어 올리고 상부 및 하부 받침대를 세척하십시오. 최소한, 새 실험실용 와이프로 받침대를 닦으십시오. 자세한 내용은 받침대 세척을 참조하십시오.

유의사항 •기기 위나 기기 근처에서 분무기나 스프레이 병을 사용하지 마십시오. 액체가 기기 내부로 흘러 들어가 영구적인 손상을 초래할 수 있습니다. •받침대에서 불화수소산(HF)을 사용하지 마십시오. 플루오르화물 이온은 석영섬유 광케이블을 영구적으로 손상시킵니다.

절차

1.홈 화면에서 Proteins(단백질) 탭을 선택한 후, Protein & Labels(단백질 및 라벨)를 선택하십시오.

2.원하는 경우 setup options(설정 옵션)를 구성한 다음, Save(저장)을 선택하십
시오.

팁: 사전 정의된 목록에서 염료를 선택하거나 Dye/Chromophore Editor(염료/발색단 편집기)를 사용하여 맞춤형 염료를 추가하십시오.

3.NanoDrop Ultrac 또는 NanoDrop Ultrac FL 모델을 사용하는 경우, 올바른 측정 경로를 선택하십시오.

–큐벳을 사용할 경우, 화면 상단의 드롭다운 메뉴에서 Cuvette(큐벳)을 선택하면 큐벳 설정이 표시됩니다. 원하는 경로 길이, 교반 속도 및 가열을 선택한 후 드롭다운 메뉴를 닫으십시오.

–받침대를 사용하여 측정하는 경우, 화면 상단 설정에서 Pedestal(받침대)을 선택된 상태로 유지하십시오.

4.하부 받침대에 블랭킹 용액 1~2 µL를 피펫팅하고 암을 내리거나, 블랭킹 큐벳을 큐벳 홀더에 삽입하십시오.

팁: 큐벳을 사용할 경우, 큐벳 빛경로를 기기 빛경로와 일치시켜야 합니다.

5.Blank(블랭크)를 선택하고 측정이 완료될 때까지 기다리십시오.

팁: Auto-Blank(자동 블랭크)가 켜져 있는 경우, 암을 내리면 블랭크 측정이 자동으로 시작됩니다. (이 옵션은 큐벳 측정 시에는 사용할 수 없습니다.)

6.암을 들어 올리고 새 실험실용 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 블랭킹 큐벳을 제거하십시오.

7.받침대에 2 µL의 샘플 용액을 피펫팅하고 암을 내리거나, 샘플 큐벳을 큐벳 홀더에 삽입하십시오.

8.샘플 측정 시작:

–받침대: Auto-Measure(자동 측정)가 켜져 있는 경우, 암을 내리면 측정이 시작됩니다. Auto-Measure(자동 측정)가 꺼져 있으면 암을 내리고 Measure
(측정)을 선택하십시오.

–큐벳: Measure(측정)을 선택하십시오.

샘플 측정이 완료되면 스펙트럼과 측정값이 표시됩니다(다음 섹션 참조).

9.샘플 측정이 모두 끝나면 End Experiment(실험 종료)를 선택하십시오.

10.암을 들어 올리고 새 와이프로 양쪽 받침대를 세척하거나, 샘플 큐벳을 제거하십시오.

관련 주제

•단백질 측정을 위한 모범 사례

•마이크로 부피 샘플 측정

•큐벳을 사용한 샘플 측정

•샘플 및 블랭크 준비

•기본 기기 작동