Fluorescence Performance Check (Kontrola działania fluorescencji)

Kontrolę wydajności fluorescencji należy przeprowadzać co 6 miesięcy, aby potwierdzić, że wydajność i dokładność fluorescencji są zgodne ze specyfikacjami. Ten moduł jest dostępny tylko w przypadku instrumentów NanoDrop Ultra FL i NanoDrop Ultrac FL.

Niezbędne materiały eksploatacyjne

• zestaw do weryfikacji fluorescencji FL-1 (CHEM-FL1-KIT)

–odczynnik próby ślepej

–odczynnik do fluorescencji zieleni

–odczynnik do fluorescencji głębokiej czerwieni

• plastikowe probówki 0,2 ml, z płaskim wieczkiem lub podobne

• niestrzępiące się ściereczki laboratoryjne

• dejonizowana woda (DI H2O)

–pipetor jednokanałowy o małej objętości (0,5-10 μl) (z odpowiednimi końcówkami), skalibrowany

–pipetor jednokanałowy 10-100 μl (z odpowiednimi końcówkami), skalibrowany

• rękawice laboratoryjne

• wytrząsarka typu Vortex

• miniwirówka

Przed rozpoczęciem

Przygotować trzy sterylne, plastikowe probówki bursztynowe dla trzech z czterech odczynników dostarczonych w zestawie do weryfikacji fluorescencji FL-1 (odczynnik próby ślepej, odczynnik do zielonej fluorescencji i odczynnik do głębokiej czerwonej fluorescencji) i oznaczyć je jako: próba ślepa, wzorzec zieleni 2 i wzorzec głębokiej czerwieni 2.

Przygotować dwie dodatkowe sterylne, plastikowe probówki bursztynowe do rozcieńczania odczynnika do zielonej fluorescencji i odczynnika do głębokiej czerwonej fluorescencji i oznaczyć je jako wzorzec zieleni 1 i wzorzec głębokiej czerwieni 1.

probówka do próby pustej

–Dodać 100 µl odczynnika do próby pustej do probówki.

Próbówka z wzorcem zieleni 2

–Dodać 33 µl odczynnika fluorescencji zieleni.

Próbówka z wzorcem głębokiej czerwieni 2

–Dodać 45 µl odczynnika fluorescencji głębokiej czerwieni.

Próbówka z wzorcem zieleni 1

–Dodać 27 µl rozcieńczalnika.

–Do tej probówki przenieść 3 µl wzorca zieleni 2 i worteksować przez 3–5 sekund.

–Krótko odwirować – 10-krotnie rozcieńczony odczynnik do fluorescencji zieleni jest gotowy.

Próbówka z wzorcem głębokiej czerwieni 1

–Dodać 15 µl rozcieńczalnika.

–Do tej probówki przenieść 15 µl wzorca głębokiej czerwieni 2 i worteksować przez 3–5 sekund.

–Krótko odwirować – 2-krotnie rozcieńczony odczynnik do fluorescencji głębokiej czerwieni jest gotowy.

Aby przeprowadzić kontrolę działania fluorescencji

1. Na ekranie głównym należy wybrać ikonę Diagnostics (Diagnostyka) , a następnie Fluorescence Performance Check (Kontrola działania fluorescencji).

2. Pojawi się komunikat informujący, że test wymaga użycia zestawu do weryfikacji fluorescencji FL-1, należy wybrać Run (Uruchom).

3. Należy upewnić się, że nic nie znajduje się na podstawie i wybrać opcję Blank (Próba pusta).

4. Odmierzyć pipetą 2 µl odczynnika do próby pustej na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona , należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona , należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

5. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką.

6. Powtórzyć kroki 4 i 5 dla łącznie pięciu pomiarów.

7. Odmierzyć pipetą 2 µl rozcieńczonego odczynnika do fluorescencji zieleni z probówki wzorzec zieleni 1 na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona, należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona, należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

8. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką.

9. Powtórzyć kroki 7 i 8 dla łącznie pięciu pomiarów.

10. Odmierzyć pipetą 2 µl odczynnika do fluorescencji zieleni z probówki wzorzec zieleni 2 na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona, należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona, należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

11. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką.

12. Powtórzyć kroki 10 i 11 dla łącznie pięciu pomiarów.

13. Odmierzyć pipetą 2 µl odczynnika do próby pustej na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona, należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona, należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

14. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką.

15. Powtórzyć kroki 13 i 14 dla łącznie pięciu pomiarów.

16. Odmierzyć pipetą 2 µl rozcieńczonego odczynnika do fluorescencji głębokiej czerwieni z probówki wzorzec głębokiej czerwieni 1 na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona, należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona, należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

17. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką.

18. Powtórzyć kroki 16 i 17 dla łącznie pięciu pomiarów.

19. Odmierzyć pipetą 2 µl rozcieńczonego odczynnika do fluorescencji głębokiej czerwieni z probówki wzorzec głębokiej czerwieni 2 na dolną podstawę.

a.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest włączona, należy opuścić ramię.

b.Jeśli funkcja Auto-Measure (Pomiar automatyczny) jest wyłączona, należy opuścić ramię i wybrać opcję Measure (Pomiar).

20. Podnieść ramię i wyczyścić obie podstawy nową ściereczką. Powtórzyć
kroki 19 i 20 dla łącznie pięciu pomiarów.

Aby ocenić wyniki kontroli działania fluorescencji

Ogólny wynik testu zostanie wyświetlony w górnej części ekranu jako zielony „Pass (Pozytywny)” lub czerwony „Fail (Negatywny)”.

Jeśli wyniki nie mieszczą się w specyfikacji, należy powtórzyć procedurę z nowymi rozcieńczeniami odczynników FL-1.

Jeśli wyniki nie są zgodne ze specyfikacją po drugiej próbie, prosimy o kontakt z nami.