Comprobación del rendimiento de la fluorescencia

Realice la comprobación del rendimiento de la fluorescencia cada 6 meses para confirmar que el rendimiento de la fluorescencia y la precisión estén dentro de las especificaciones. Este módulo solo está disponible en los instrumentos NanoDrop Ultra FL y NanoDrop Ultrac FL.

Suministros necesarios

• Kit de ensayo de verificación de fluorescencia FL-1 (CHEM-FL1-KIT)

–Diluyente de reactivo de blanco

–Reactivo de fluorescencia verde

–Reactivo de fluorescencia de rojo lejano

• tubos de plástico, 0,2 ml, tapa plana o similar

• toallitas de laboratorio sin pelusa

• agua desionizada (H2O DI)

–pipeta monocanal de bajo volumen (0,5 a 10 μl) (con puntas adecuadas), calibrada

–pipeta monocanal de 10 a 100 μl (con puntas adecuadas), calibrada

• guantes de laboratorio

• mezclador de vórtice

• minicentrífuga

Antes de empezar

Prepare tres tubos de plástico ámbar estériles para tres de los cuatro reactivos proporcionados en el kit de verificación de fluorescencia FL-1 (reactivo de blanco, reactivo de fluorescencia verde y reactivo de fluorescencia de rojo lejano) y etiquételos como blanco, estándar verde 2 y estándar rojo lejano 2.

Configure dos tubos de plástico ámbar estériles adicionales para diluciones, tanto del reactivo de fluorescencia verde como del reactivo de fluorescencia de rojo lejano, y etiquételos como estándar verde 1 y estándar rojo lejano 1.

Tubo de blanco

–Agregue 100 µl de reactivo de blanco al tubo de blanco.

Tubo estándar verde 2

–Agregue 33 µl de reactivo de fluorescencia verde.

Tubo de estándar de rojo lejano 2

–Agregue 45 µl de reactivo de fluorescencia de rojo lejano.

Tubo estándar verde 1

–Agregue 27 μl de diluyente.

–Transfiera 3 μl del estándar verde 2 a este tubo y agite en el mezclador de vórtice durante 3 a 5 segundos.

–Centrifugue brevemente. Un reactivo de fluorescencia verde diluido 10 veces está listo.

Tubo de estándar de rojo lejano 1

–Agregue 15 μl de diluyente.

–Transfiera 15 μl del estándar de rojo lejano 2 a este tubo y agite en el mezclador de vórtice durante 3 a 5 segundos.

–Centrifugue brevemente. Un reactivo de fluorescencia de rojo lejano diluido 2 veces está listo.

Para realizar una comprobación de rendimiento de fluorescencia

1. En la pantalla de inicio, seleccione el icono de diagnóstico , seguido de Fluorescence Performance Verification (Verificación de rendimiento de fluorescencia).

2. Aparecerá un mensaje que indica que la prueba requiere el uso del kit de verificación de fluorescencia FL-1; a continuación, seleccione Run (Ejecutar).

3. Asegúrese de que no haya nada en el pedestal y seleccione Blank (Blanco).

4. Pipetee 2 µl del reactivo de blanco del tubo de blanco en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada , baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada , baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

5. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

6. Repita los pasos 4 y 5 para un total de cinco mediciones.

7. Pipetee 2 µl del reactivo de fluorescencia verde diluido del tubo del estándar verde 1 en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

8. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

9. Repita los pasos 7 y 8 para un total de cinco mediciones.

10. Pipetee 2 µl del reactivo de fluorescencia verde del tubo del estándar verde 2 en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

11. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

12. Repita los pasos 10 y 11 para un total de cinco mediciones.

13. Pipetee 2 µl del reactivo de blanco del tubo de blanco en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

14. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

15. Repita los pasos 13 y 14 para un total de cinco mediciones.

16. Pipetee 2 µl del reactivo de fluorescencia de rojo lejano diluido del tubo de estándar de rojo lejano 1 en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

17. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

18. Repita los pasos 16 y 17 para un total de cinco mediciones.

19. Pipetee 2 µl del reactivo de fluorescencia de rojo lejano diluido del tubo de estándar de rojo lejano 2 en el pedestal inferior.

a.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo.

b.Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

20. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva. Repita los pasos 19 y 20 para un total de cinco mediciones.

Para interpretar los resultados de la comprobación del rendimiento de fluorescencia

El resultado general de la prueba se mostrará en la parte superior de la pantalla como verde “Pass” (Aprobado) o rojo “Fail” (No aprobado).

Si los resultados no están dentro de las especificaciones, repita el procedimiento con nuevas diluciones de los reactivos FL-1.

Si los resultados no cumplen con las especificaciones después del segundo intento, contáctenos.