Ajustes

La pantalla Protein A280 Setup (Configuración de proteína A280) aparece después de seleccionar la aplicación en la pestaña Proteins (Proteínas) en la pantalla de inicio. Para mostrar los ajustes de Protein A280, en la pantalla de medición de Protein A280, seleccione el icono de configuración .

La aplicación Protein A280 proporciona una variedad de opciones de tipo de muestra para el análisis de proteínas purificadas.

Cada tipo de muestra aplica un coeficiente de extinción único a los cálculos de proteínas. Si se conoce el coeficiente de extinción de la muestra, elija la opción e + PM (molar) o e1 % (masa) e ingrese el valor. De lo contrario, calcule el coeficiente
de extinción o elija la opción que mejor se adapte a la solución de muestra. Si solo necesita una estimación aproximada de la concentración de proteínas y se desconoce el coeficiente de extinción de la muestra, seleccione la opción de tipo de muestra 1 abs.=1 mg/ml.

Sugerencia Idealmente, el coeficiente de extinción debe determinarse empíricamente utilizando una solución de la proteína del estudio con una concentración conocida utilizando la misma solución amortiguadora.

Configu- ración | Opciones disponibles | Coeficiente de ext. de masa (l/g-cm) | Descripción
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Denomina- ción automática | On (Activado) u Off (Desactivado) | No corresponde. | Cuando está habilitado, a cada muestra se le asigna un nombre inicial predeterminado “sample” (muestra), seguido del número de muestra en la secuencia. Por ejemplo, la primera muestra se llamaría “Sample 1” (Muestra 1), seguida de “Sample 2” (Muestra 2), etc. Puede modificar el nombre inicial predeterminado y sobrescribir cualquier nombre de muestra.
Corrección inicial | On (Activado) u Off (Desactivado) Ingrese la longitud de onda de corrección inicial en nm o use el valor predeterminado (340 nm) | No corresponde. | Corrige cualquier desviación causada por partículas de dispersión de luz al restar la absorbancia medida en la longitud de onda de corrección inicial especificada a los valores de absorbancia en todas las longitudes de onda en el espectro de la muestra. Como resultado, la absorbancia del espectro de la muestra es cero en la longitud de onda de corrección inicial especificada. Sugerencia: si la muestra tiene una modificación que absorbe luz a 340 nm, seleccione una longitud de onda de corrección diferente o desactive la corrección inicial.
Tipo de muestra a | 1 abs. = 1 mg/ml | Referencia general | Se recomienda cuando se desconoce el coeficiente de extinción y la estimación aproximada de la concentración de proteínas es aceptable para una solución sin otras sustancias que interfieran. Supone que la solución de proteína al 0,1 % (1 mg/ml) produce 1,0 A a 280 nm (donde la longitud de trayectoria es de 10 mm), es decir, e1 % = 10.
| BSA | 6,7 | Calcula la concentración de proteína de BSA (seroalbúmina bovina) utilizando el coeficiente de extinción de masa (e) de 6,7 l/g-cm a 280 nm para una solución de BSA al 1 % (es decir, 10 mg/ml). Suponiendo que el PM es de 66 400 daltons (Da), el coeficiente de extinción molar a 280 nm para la BSA es de aproximadamente 43 824 M-1cm-1.
| IgG | 13,7 | Adecuado para la mayoría de los anticuerpos de mamíferos (es decir, inmunoglobulina G o IgG). Calcula la concentración de proteína usando el coeficiente de extinción de masa (e) de 13,7 l/gm-cm a 280 nm para una solución de IgG al 1 % (es decir, 10 mg/ml). Suponiendo que el PM es de 150 000 daltons (Da), el coeficiente de extinción molar a 280 nm para la IgG es de aproximadamente 210 000 M-1cm-1.
| Lisozima | 26,4 | Calcula la concentración de proteína usando el coeficiente de extinción de masa (e) de 26,4 l/gm-cm a 280 nm para una solución de lisozima al 1 % (es decir, 10 mg/ml). Se supone que el coeficiente de extinción molar para la lisozima de clara de huevo oscila entre 36 000 M-1cm-1 y 39 000 M-1cm-1.
| Otra proteína (e + PM) | El usuario ingresó el coeficiente de extinción molar y el peso molecular | Se supone que la proteína tiene un coeficiente de extinción molar (e) y peso molecular (PM) conocidos, donde: (emolar)*10 = (epor ciento)*(PMproteína) Ingrese el PM en kiloDaltons (kDa) y el coeficiente de extinción molar (e) en M-1cm-1 dividido por 1000 (es decir, e/1000). Por ejemplo, para proteínas con coeficiente de extinción molar de 210 000 M-1cm-1, ingrese 210.
| Otra proteína (e1 %) | Coeficiente de extinción de masa ingresado por el usuario | Se supone que la proteína tiene un coeficiente de extinción de masa conocido (e). Ingrese el coeficiente de extinción de masa en l/g-cm para la solución de proteína de 10 mg/ml (e1 %).

aPara agregar o modificar una proteína personalizada, use el Editor de proteínas.