Cálculos

Al igual que con las otras aplicaciones de ácido nucleico, la aplicación OD600 utiliza una modificación de la ecuación de Beer-Lambert para calcular la concentración de la muestra, donde el coeficiente de extinción y la longitud de la trayectoria se combinan y se denominan “factor”. La aplicación OD600 ofrece un factor especificado por el usuario, que se utilizará junto con la ley de Beer para calcular la concentración de la muestra. Si el factor es conocido, ingréselo. De lo contrario, el valor predeterminado es 1x108, que es el factor generalmente aceptado para la mayoría de las suspensiones de células bacterianas, como E. coli. |  | Valores medidos Absorbancia de A600 Nota: en el caso de las mediciones de absorbancia de microvolumen y las mediciones tomadas con cubetas no estándar (que no sean de 10 nm), los espectros se normalizan a un equivalente de 10 mm de longitud de trayectoria. • Los valores de absorbancia del cultivo celular se miden a 600 nm utilizando el espectro normalizado. Si no se especifica la corrección de absorbancia, esta será el valor de A600 informado y el valor usado para calcular la concentración celular. • Si se especifica una corrección de absorbancia, se informa y utiliza el valor de absorbancia corregido y normalizado a 600 nm para calcular la concentración celular. A(l) absorbancia • El valor de absorbancia normalizado y corregido (si se usa) en cualquier valor longitud de onda adicional monitoreada (l) también se informa.
Las concentraciones de células calculadas se basan en el valor de absorbancia a 600 nm, el factor ingresado y la longitud de la trayectoria de la muestra. Se puede aplicar una corrección de absorbancia de un solo punto. |  | Longitud de la trayectoria de la muestra • Para las mediciones de microvolumen, el software selecciona la longitud de trayectoria óptima (entre 1,0 mm y 0,03 mm) en función de la absorbancia de la muestra en la longitud de onda de análisis. • Para las mediciones de cubetas, se utiliza la longitud de trayectoria seleccionada después de cambiar al modo de cubeta. (Consulte Ajustes de cubeta). • Los espectros y los valores de absorbancia mostrados se normalizan a un equivalente de 10 mm de longitud de trayectoria.
|  | Valores informados Concentración celular. Informado en células/ml. Los cálculos se basan en la ecuación de Beer-Lambert utilizando el valor de absorbancia de A600 corregido.

Toque la fila para seleccionar la muestra y actualizar el espectro; toque más filas para superponer hasta dieciséis espectros. Mantenga presionada la fila de la muestra para ver los detalles
de la medición.