Medición de muestras marcadas con fluoróforo

Utilice la aplicación Fluorometer (Fluorímetro) para medir la fluorescencia emitida por una variedad de muestras que se marcaron con fluoróforo. Esta aplicación funciona de manera similar a las aplicaciones dsDNA Fluorescence y RNA Fluorescence, y utiliza una curva estándar generada para determinar la concentración de las muestras medidas. Esta aplicación permite el uso de ensayos adicionales fuera de los ensayos de fluorescencia NanoDrop Ultra BR.

Antes de empezar...

Antes de tomar mediciones en el pedestal con el instrumento NanoDrop Ultra, levante el brazo del instrumento y limpie los pedestales superior e inferior. Como mínimo, limpie los pedestales con una toallita de laboratorio nueva. Para obtener más información, consulte Limpieza de los pedestales.

AVISO • No use un atomizador o rociador sobre el instrumento o cerca de él, ya que los líquidos fluirán hacia el instrumento y podrían causar daños permanentes. • No use ácido fluorhídrico (HF) sobre los pedestales. Los iones de fluoruro causarán un daño permanente a los cables de fibra óptica de cuarzo.

Preparación de muestras y estándares

Para obtener instrucciones sobre la preparación de los estándares y las muestras del ensayo, consulte las instrucciones que acompañan el ensayo que está realizando.

Consulte la sección Cómo trabajar con curvas estándar para obtener más información sobre las opciones disponibles al crear una curva estándar.

Medición de estándares y muestras marcadas con fluoróforo mediante fluorescencia

1. En la pantalla de inicio, seleccione la pestaña Fluorescence (Fluorescencia) y luego seleccione Fluorometer (Fluorímetro).

2. Seleccione una de las opciones de LED de excitación (azul o rojo).

3. Seleccione cualquiera de las opciones de configuración si lo desea y luego seleccione Save (Guardar).

4. Mida los estándares:

a.Pipetee 2 µl del tubo de ensayo que contiene la referencia en el pedestal inferior y baje el brazo. La referencia no debe contener ninguno de los analitos de interés.

•Si la función Auto-Measure (Medición automática) está desactivada , seleccione Measure (Medir) para comenzar la medición.

•Si la función Auto-Measure (Medición automática) está activada , la medición comenzará automáticamente después de bajar el brazo.

Nota Utilice siempre una alícuota nueva de 2 µl para cada medición.

b.Una vez completada la medición, retire la muestra del pedestal superior e inferior usando una toallita de laboratorio seca.

c.Si la configuración de réplicas es mayor que 1, repita la medición hasta que se completen todas las réplicas.

–Repita los subpasos anteriores para el estándar n.º 1 y todos los estándares restantes, incluidas las mediciones de réplicas adicionales.

–Cuando se hayan medido todos los estándares y todas las réplicas, aparecerá un mensaje con opciones para volver a medir los estándares o comenzar a medir las muestras.

–Si terminó de medir los estándares, seleccione Measure Samples (Medir muestras).

5. Medir las muestras:

a.Ingrese o edite el ID de la muestra en la parte superior de la pantalla al marcar la casilla e ingresar un nuevo nombre de muestra.

b.Pipetee 2 µl del tubo de ensayo que contiene la muestra correspondiente en el pedestal inferior y baje el brazo.

•Si la función Auto-Measure (Medición automática) está desactivada , seleccione Measure (Medir) para comenzar la medición.

•Si la función Auto-Measure (Medición automática) está activada , la medición comenzará automáticamente después de bajar el brazo.

Nota Utilice siempre una alícuota nueva de 2 µl para cada medición.

c.Cuando finaliza la medición de la muestra, se muestra la curva estándar y los valores informados (consulte la siguiente sección).

d.Una vez completada la medición, retire la muestra del pedestal superior e inferior usando una toallita de laboratorio seca.

e.Repita los subpasos para medir todas las muestras restantes (siguiendo las indicaciones en pantalla).

f.Cuando haya terminado de medir las muestras, seleccione End Experiment (Finalizar experimento).

6. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

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