Medición de Oligo DNA Pro u Oligo RNA Pro

Utilice las aplicaciones Oligo DNA Pro y Oligo RNA Pro para cuantificar oligonucleótidos que se absorben a 260 nm con mayor precisión en concentraciones más altas (>62,5 A). Los coeficientes de extinción molar se calculan automáticamente en función de la secuencia inicial de la muestra definida por el usuario. Estas aplicaciones informan la concentración de ácido nucleico y dos relaciones de absorbancia (A260/A280 y A260/A230). También se puede utilizar una corrección inicial de un solo punto.

Antes de empezar...

Antes de tomar mediciones en el pedestal con el instrumento NanoDrop Ultra, levante el brazo del instrumento y limpie los pedestales superior e inferior. Como mínimo, limpie los pedestales con una toallita de laboratorio nueva. Para obtener más información, consulte Limpieza de los pedestales.

Nota Si el oligonucleótido se ha modificado, por ejemplo, con un tinte fluoróforo, consulte con el fabricante del oligonucleótido para determinar si la modificación contribuye con la absorbancia a 260 nm. Si es así, recomendamos utilizar la aplicación Microarray (Micromatriz) para cuantificar la concentración de ácido nucleico. La aplicación Microarray incluye una corrección para eliminar del resultado de la cuantificación de oligonucleótidos cualquier contribución a la absorbancia por el tinte.

AVISO • No use un atomizador o rociador sobre el instrumento o cerca de él, ya que los líquidos fluirán hacia el instrumento y podrían causar daños permanentes. • No use ácido fluorhídrico (HF) sobre los pedestales. Los iones de fluoruro causarán un daño permanente a los cables de fibra óptica de cuarzo.

Procedimiento

1. En la pantalla de inicio, seleccione la pestaña Nucleic Acids (Ácidos nucleicos) y luego seleccione Oligo DNA Pro u Oligo RNA Pro, según sea necesario.

2. Seleccione cualquiera de las opciones de configuración si lo desea y luego seleccione Save (Guardar).

3. Pipetee 1 a 2 µl de solución de blanco en el pedestal inferior y baje el brazo.

4. Seleccione Blank (Blanco) y espere a que se complete la medición.

Sugerencia: si la opción Auto-Blank (Blanco automático) está activada, la medición del blanco comienza automáticamente después de bajar el brazo.

5. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita de laboratorio nueva.

6. Pipetee 1 a 2 µl de solución de muestra en el pedestal.

7. Inicie la medición de la muestra:

–Si la opción Auto-Measure (Medición automática) está activada, baje el brazo; si está desactivada, baje el brazo y seleccione Measure (Medir).

Cuando finaliza la medición de la muestra, se muestran el espectro y los valores informados (consulte la siguiente sección).

8. Cuando haya terminado de medir las muestras, seleccione End Experiment (Finalizar experimento).

9. Levante el brazo y limpie ambos pedestales con una toallita nueva.

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